- 一文解析細胞破碎的三種方法
- 更新日期:2021-12-13 瀏覽次數:4723
細胞破碎,細胞破碎技術是指利用外力破壞細胞膜和細胞壁,使細胞內容物包括目的產物成分釋放出來的技術。細胞破碎分離提純某一種蛋白質時,首先要把蛋白質從組織或細胞中釋放出來并保持原來的天然狀態(tài),不喪失活性。所以要采用適當的方法將組織和細胞破碎。不同的生物體或同一生物體的不同部位的組織,其細胞破碎的難易不一,使用的方法也不相同,如動物臟器的細胞膜較脆弱,容易破碎,植物和微生物由于具有較堅固的纖維素、半纖維素組成的細胞壁。
下面小編簡單解析一下細胞破碎的三種方法,如下所示:
(1)酸堿處理:調節(jié)pH值,改變蛋白質的荷電性質,提高產物的溶解度。
(2)化學試劑處理:用表面活性劑或有機溶劑(甲苯)處理細胞,增大細胞壁的通透性,降低胞內產物的相互作用,使之容易釋放。
(3)酶菌溶:利用溶解細胞壁的酶處理菌體細胞,使細胞壁受到部分或*破壞后,再利用滲透壓沖擊等方法破壞細胞膜,進一步增大胞內產物的通透性。 酶溶的優(yōu)點:操作溫和,選擇性強,酶能快速地破壞細胞壁,而不影響細胞內含物的質量,但缺點是酶的費用高,因而限制了它在大規(guī)模生產中的應用。
(4)化學滲透法與機械破碎法相比:速度低,效率差,且化學或生化試劑的添加形成新的污染,給進一步的分離純化增添麻煩。但化學滲透法選擇性高,胞內產物的總釋放率低,可有效抑制核酸的釋放,料液粘度小,有利于后處理。